Effect of coinfection with influenza virus and bacteria on host damage / Efecto de la coinfección por virus de la influenza y bacterias en el daño al hospedero

Abstract Background: Influenza virus infection is often complicated by a bacterial infection, with this coinfection causing severe pneumonia. If not timely treated, the disease can cause death. Objective: To demonstrate, in animal models, that coinfection with influenza virus and bacteria that affect the respiratory tract causes multisystemic damage. Method: Six groups of mice were formed: a control group, one infected with the influenza virus, two infected with bacteria: Haemophilus influenzae and Streptococcus pneumoniae, respectively; and two co-infected with influenza virus and Haemophilus influenzae or Streptococcus pneumoniae, respectively. Results: Of the six groups of mice, only the group co-infected with influenza virus and Streptococcus pneumoniae showed damage to thoracic and abdominal organs. A decrease in serum cytokine levels was found in all study groups, which was more pronounced in the co-infected mice. Conclusions: The groups of mice infected with Streptococcus pneumoniae or influenza virus alone showed no damage, which indicates that coexistence of these infections caused the damage in the group of co-infected mice.

Resumen Antecedentes: La infección por el virus de la influenza con frecuencia se complica con una infección bacteriana, coinfección que provoca cuadros graves de neumonía, la cual puede ocasionar la muerte si no es tratada en forma oportuna. Objetivo: Demostrar en modelos animales que la coinfección por el virus de la influenza y bacterias que afectan el tracto respiratorio ocasiona daño multisistémico. Método: Se formaron seis grupos de ratones: un grupo control, uno infectado de virus de la influenza, dos infectados de bacterias: Haemophilus influenzae y Streptococcus pneumoniae, respectivamente; y dos coinfectados de virus de la influenza y Haemophilus influenzae y Streptococcus pneumoniae, respectivamente. Resultados: De los seis grupos de ratones, solo en el grupo coinfectado de virus de la influenza y Streptococcus pneumoniae se observó daño en órganos torácicos y abdominales. En todos los grupos se encontró disminución de los niveles séricos de las citocinas, mayor en los ratones coinfectados. Conclusiones: Los grupos de ratones infectados solo de Streptococcus pneumoniae o el virus de la influenza no presentaron daños, lo cual indica que la coexistencia de estas infecciones fue la que ocasionó el daño en el grupo de ratones coinfectados.

incorporación de la técnica de RT-PCR para la detección del virus sincitial respiratorio / Incorporation of the RT-PCR technique to the detection of respiratory syncitial virus

Objetivo: Estandarizar e incorporar técnicas de biología molecular, RT-PCR para la detección del virus sincitial respiratorio que complementen y enriquezcan el diagnóstico.Material y métodos: se utilizaron cepas de referencia del virus sincitial respiratorio de los grupos A y B (virus stock ATCC), las cuales se propagaron y titularon en células HEp-2. Se realizaron pruebas de inmunofluorescencia indirecta y de la prueba RT-PCR. Para ello se extrajo el ARN del virus con trizol, se realizó una transcripción reversa para obtener ADNc y, para la PCR se utilizaron oligonucleótidos que amplifican un fragmento del gen de la proteína G del virus sincitial respiratorio. Para comprobar la especificidad de la prueba se utilizaron virus de la misma familia (sarampión y parainfluenza) y virus de diferentes familias (influenza y adenovirus). Al evaluar la sensibilidad se utilizaron diferentes diluciones del ADNc viral.Resultados: en el cultivo, el efecto citopático se puede observar claramente del cuarto al octavo día. La prueba de inmunofluorescencia como se sabe es una técnica sensible y específica para el virus. La RT-PCR que se desarrollo, fue efectiva para la amplificación del ADNc; además, mostró ser específica para el virus sincitial respiratorio, ya que no amplifica material genético de otros virus incluyendo a aquellos que pertenecen a la misma familia. La sensibilidad de la prueba es alta, alcanzando a amplificar hasta picogramos de ADNc.Conclusiones: la rapidez de la inmunofluorescencia, permite dar un diagnóstico presuntivo que después puede ser comprobado por el aislamiento y propagación del virus en cultivo celular. La técnica de RT-PCR con los oligonucleótidos que utilizamos fue sensible, específica y rápida, por tanto debe ser tomada en cuenta para el apoyo al diagnóstico clínico. Con lo anterior, no se trata de sustituir las técnicas tradicionales, sino contar con mayores opciones y además reforzarlas; de esta manera, se podrá fundamentar mejor el diagnóstico de las infecciones virales.